自耳石科学(Otolithology)进入21世纪以来,其研究主要集中在耳石微结构、耳石微化学与耳石同位素三个方面。显而易见,耳石已成为鱼类渔业科研者必不可少的工具之一,下文主要介绍鱼类耳石摘取的实验流程(鳕鱼、鲑鱼、金枪鱼)及注意事项。
鳕鱼:图片来源百度图库鲑鱼:图片来源百度图库
摘取鳕鱼、鲑鱼耳石
金枪鱼:图片来源百度图库摘取金枪鱼耳石
鱼类耳石摘取实验流程及注意事项
准备实验工具,如镊子,剪刀,刀片等;
用食指和拇指抠住鱼的眼窝,防止鱼体滑落;
用刀片从鱼头部顶端眼后部约一眼径的距离向后下方斜切(30°)约一头长深,部分物种,也可沿鳃盖3/4处曲线部分进行垂直切口;
切除头骨顶部后,找到白色柔软的大脑,沿切口两端往下压使得大脑更加清晰地暴露;
使用镊子沿大脑后部取出耳石(耳石不会依附于任何软组织)。
耳石摘取技术
当耳石长度超过μm时:
根据鱼体大小选择合适的工具(如小刀,刀片,锯子等)从头部顶端沿鳃盖边缘或枕骨稍后部横切直至大脑暴露,小心移除大脑,用镊子取出耳石。如果耳石太小,可在解剖镜下观察操作。对于体宽较大的物种,可沿鳃孔斜向上切开鳃弓直至暴露耳石。
当耳石长度低于μm时:
(1)鱼体体长15mm,将鱼体放置于载玻片表面,滴加几滴去离子水、酒精(70%)、镜油、丙三醇(甘油)、二甲苯或其他清洁剂浸泡鱼头,解剖镜下观察,耳石会产生偏光折射,再用细针挑出耳石。
(2)鱼体体长20mm,将鱼体放置于载玻片表面,滴加漂白剂(次氯酸钠)浸泡鱼头,3分钟内,鱼头将溶化,耳石将暴露于载玻片上,再用细针挑出耳石。较大的个体(20~mm),浸泡时间可适当延长,也可切去身体部分,只保留头部便于观察操作。
(3)对于耳石特别小的鱼(耳石长度μm),可用%酒精对其完全脱水,再用%酒精与包埋液按不同比例混合(例1:1.1:3.1:9),不添加固化剂,将鱼体包埋,研磨抛光,在扫描电镜下(SEM)观察。
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